再生障碍性贫血患者细胞免疫功能与白细胞介素8水平检测
临床血液学杂志 1999年第6期第12卷 论著
作者：李府 郑立波
单位：山东胜利石油管理局胜利医院山东省东营，257055
关键词：贫血，再生障碍性；t细胞亚群；白细胞介素-8
摘要 目的：探讨再生障碍性贫血(再障)的免疫发病机制，阐明t细胞亚群及il-8在再障患者中的变化及临床意义。方法：用单抗试剂盒，采用sap法和双抗夹心酶联免疫吸附法(elisa)对9例再障患者和10例正常人外周血t细胞亚群及血清il-8含量进行测定。结果：再障患者外周血cd3、cd4亚群细胞减低，cd8亚群细胞增高，cd4/cd8降低，再障患者血清中il-8含量明显高于正常对照组。结论：细胞免疫功能异常及造血负调控因子il-8可能在再障发病中起一定的作用。
detection of the cellular immune function and il-8 level in aplastic anemia patients
li fu,zheng libo
sheng li hospital of sheng li petroleum administrative bureau,dongying,257055
abstract objective:to investigate the role of cellular immune function and interleukin-8 in the pathogenesis of aplastic anemia(aa) and its clinical significance.method:t lymphocyte subsets in the peripheral blood mononuclear cells,and the levels of il-8 in the serum in 9 aa patients and 10 normal controls were measured by sap and elisa.resutl:cd3 cells,cd4 cells and cd4/cd8 cells were lower,and cd8 cells and il-8 levels were higher in aa patients than in normal controls.conclusion:the cellular immune dysfunction participate in the pathogenesis of aa.il-8 may have a potential role in pathogenesis of aa.
key words anemia,aplastic t lymphocyte subsets interleukin-8
已有证据表明，细胞免疫功能紊乱参与了造血功能衰竭的病理过程〔1〕，而对造血负调控因素的研究，是目前了解再生障碍性贫血(再障)的成因和机制的热点。我们应用单克隆抗体检测技术和双抗夹心elisa法对再障患者外周血t细胞亚群和白细胞介素8(il-8)进行测定，旨在探讨这些因素在再障发生发展过程中的作用及其临床意义。
1 病例与方法
1.1 病例来源 再障9例，男7例，女2例，年龄10～54岁，平均33.9岁，均为我院住院初诊患者，诊断符合文献标准〔2〕。正常对照组：10名，男女各5名，年龄18～24岁，平均21.3岁。分离单个核细胞用于t细胞亚群检测，分离血清，-20℃冻存用于il-8的检测。
1.2 实验方法 t细胞亚群检测试剂盒购自北京中山生物技术公司，采用sap法。il-8检测试剂盒购自深圳晶美生物技术公司，采用双抗夹心酶联免疫吸附法(elisa)。其操作按试剂盒说明进行。
1.3 统计学处理 再障患者组与正常对照组t细胞亚群及il-8比较采用样本均数的t检验，以p＜0.05为差异有显著性。
2 结果
2.1 再障患者组与正常对照组t细胞亚群的比较 10例正常对照组cd3、cd4亚群细胞分别为(67.70±4.37)%和(44.40±4.09)%，9例再障患者组cd3、cd4亚群细胞分别为(59.67±7.42)%和(30.78±3.63)%，再障组明显低于正常对照组(p值分别＜0.005，＜0.001)；而正常对照组cd8亚群细胞为(23.30±2.91)%，再障患者组为(28.89±4.96)%，显著高于正常对照组(p＜0.005)；再障患者组cd4/cd8比例明显降低(1.08±0.18 vs 1.94±0.32， p＜0.001)。
2.2 再障患者组与正常对照组il-8水平的比较 正常对照组il-8含量为47.80±23.69 ng/l，而再障患者组il-8含量为499.95±229.46 ng/l，显著高于正常对照组(p＜0.001)。
3 讨论
再生障碍性贫血是一组以造血组织功能衰竭为特征的综合征，其病因及发病机理尚不明确。近年来研究发现，细胞免疫紊乱参与再障的发病，认为再障患者外周血中t细胞亚群失衡〔2〕。主要表现为cd8细胞功能亢进，且异常激活的cd8细胞能抑制造血。我们通过对再障患者细胞免疫功能检测发现，再障患者cd8细胞亚群升高，cd4细胞亚群降低，支持再障患者t细胞亚群失衡的观点。我们发现再障患者组cd3亚群降低，这与文献报道不符〔3〕，可能与所用试剂及实验方法不同有关。细胞因子对造血的调节是当前血液学研究的热点之一，其中造血负调控因素与再障的关系已越来越引起中外学者的重视。再障患者除cd8细胞亚群功能亢进外，白细胞介素-2(il-2)、干扰素(ifn)、肿瘤坏死因子(tnf)等造血负调控因子水平升高，这些异常均可抑制造血〔4〕。il-8是细胞趋化因子家族的成员之一，在正常人体中的含量甚微。近年研究发现il-8与造血有关，对造血干/祖细胞有抑制作用，从而影响造血。我们的研究表明，再障患者il-8水平明显高于正常对照组。由于il-8对造血干/祖细胞有抑制作用，再障患者体内升高的il-8可能参与了再障骨髓造血衰竭的病理过程，也或进一步加重了此过程。通过对再障患者细胞免疫功能及细胞因子检测，可进一步明确再障的成因及发病机制，而且在实践上也能直接指导再障的诊断、治疗，为临床再障患者给予免疫治疗提供了理论依据。免疫异常型再障给予免疫调节，常可收到意想不到的疗效。
参考文献
1 mentzel u,voget h,rossol r,et al.analysis of lymphocyte subsets in patients with aa before and during immunosuppressive therapy.ann hematol,1993,66:127～127
2 maciejewski jp,hibbs jr,anderson s,et al.bone marrow and peripheral blood lymophocyte phenotype in patients with bone marrow fanure.exp hematol,1994,22:1102～1104
3 王欣，张明珙，宋素琴等.再生障碍性贫血患者细胞免疫功能与造血细胞因子的研究.中华血液学杂志，1998，19(4)：181～183
4 邵宗鸿.深入开展再生障碍性贫血的基础及临床研究.中华血液学杂志，1998，19(4)：173～175
(1999-03-16 收稿 1999-08-08 修回)
